Introduction
Perfundovany bioreaktor je navrzeny pro kultivaci jednoho milionu jaternich bunek v matici 20 x 50 mikrokanalku pod kontinualnim prutokem vyzivneho roztoku. Milionu bunek je dostatecny pro splneni citlivostnich pozadavku vetsiny dulezitych analyz. Kvantitativni rozbor latek ve vycerpanem vyzivnem roztoku a analyza bunek vyjmutych z bioreaktoru predstavuji hlavni zpusoby experimentalniho vyhodnoceni. Perfundovany bioreaktor je mozne pouzit napriklad jako model pro zkoumani ucinnosti ruznych vektoru genove terapie.
Design
Perfundovany bioreaktor ma kapacitu priblizne jednoho milionu bunek, ktere jsou kultivovany v 1000 mikrokanalcich. Telo bioreaktoru se sklada ze tri hlavnich polykarbonatovych casti. Nosic bunek je prolozen mezi spodnimi dvema castmi. Treti cast funguje jako opticke okenko, ktere je otevrene pri vysevu bunek. Vysev bunek se provadi pipetovanim suspenze bunek nad mikrokanalky nosice.
Nosic bunek
Nosic bunek obsahuje matici 20 x 50 mikrokanalku. Mikrokanalky se ctvercovym pudorysem maji rozmery 300 x 300 x 230 µm. Kulate mikrokanalky maji prumer 340 µm.
Polykarbonatovy nosic vyrobeny laserovym obrabenim. Mikrokanalky jsou v matici 20 x 50. Kazdy mikrokanalek ma rozmery 300 x 300x 230 µm. Fotografie. Karel Domansky
System na perfundovani (promyvani) tkane
Perfundovany bioreaktor je propojeny hadickami s vysokou plynovou produsnosti se dvema externimi peristaltickymi pumpami, ktere cirkuluji kultivacni roztok mezi reservoarem a bioreaktorem. Ctyri otvory (viz obrazek dole) osazene konektory umoznuji pouzit nekolika zpusobu perfundovani tkane v nosici.
Fotografie: Karel Domansky
3D model
Rozlozeny pohled znazornuje jednotlive soucastky perfundovaneho bioreaktoru. Serizeni kanalku v nosici bunek a v podpere filtru je docilene pomoci montaznich koliku.
Design a 3D model: Karel Domansky
Vyrobni postup
Tri hlavni casti perfundovaneho biorektoru byly vyrobeny z polykarbonatu pocitacove rizenym obrabenim. Velikost techto casti po sestaveni je 78 x 54 x 21 mm. Nosice byly rovnez vyrobene z polykarbonatu - bud laserovym obrabenim nebo mikrovrtanim. Upevnovaci krouzky byly vyrobene obrabenim z nerezavejici ocele. Tesneni bylo vyrazeno ze silikonu.